聚丙烯酰胺凝膠電泳(Polyacrylamide Gel Electrophoresis, PAGE)
支持介質:丙烯酰胺(Acr)與交聯劑甲叉雙丙烯酰胺(Bis)聚合形成的凝膠,孔徑可通過調整 Acr/Bis 比例控制(5%-20% 凝膠對應不同孔徑)。
核心特點:孔徑小(1-10nm)、分辨率(可區分分子量相差 1kDa 的蛋白質)、重復性好。
適用對象:小分子物質,如蛋白質、小分子 DNA(<1kb)、RNA。
關鍵分支:
SDS-PAGE(十二烷基硫酸鈉 - PAGE):常用的蛋白質分析技術。SDS 是陰離子去污劑,可使蛋白質變性并結合等量 SDS(每克蛋白質結合 1.4g SDS),消除蛋白質自身電荷差異,僅通過分子大小實現分離,可用于蛋白質分子量測定、純度鑒定。
Native-PAGE(非變性 PAGE):不添加 SDS 和還原劑,蛋白質保持天然構象和電荷,分離依賴 “電荷 + 大小 + 形狀”,可用于分析蛋白質活性、復合物組成。
技術優勢與局限性
優勢:
分辨率高:可區分結構 / 性質極相似的物質(如不同亞型的蛋白質、僅差 1 個堿基的 DNA 片段);
樣品用量少:僅需微克(μg)甚至納克(ng)級樣品;
操作靈活:可通過調整介質、緩沖液、電場參數適配不同樣品。
局限性:
部分技術(如 PAGE)操作較繁瑣,對實驗條件要求高(如凝膠制備需避免氣泡);
變性電泳(如 SDS-PAGE)會破壞生物活性,無法用于活性物質純化;
大分子物質(如基因組 DNA)分離效率較低,需結合脈沖場凝膠電泳(PFGE)等特殊技術。
總之,電泳是現代實驗室 “分離分析” 的基石,其技術發展(如與質譜、色譜聯用)進一步拓展了在醫學、組學研究等領域的應用邊界。
電泳加工的主要類型
根據涂料顆粒的帶電性質,電泳加工主要分為兩類,其技術特點和應用場景差異顯著:
類型 涂料電荷 工件極性 核心優勢 適用場景
陰極電泳(CED) 陽離子 陰極 1. 涂層耐腐蝕性極強(可通過鹽霧測試 1000 小時以上);
2. 泳透力高(復雜工件內腔、縫隙也能均勻上漆);
3. 涂層均勻,無流掛、針孔缺陷 汽車車身及零部件(如車架、輪轂)、工程機械、高端五金件
陽極電泳(AED) 陰離子 陽極 1. 成本較低,工藝相對簡單;
2. 涂層色澤鮮艷,裝飾性好
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