電泳的分離核心依賴遷移率（Mobility, μ） —— 即帶電粒子在單位電場強度下的移動速度，其大小由粒子自身性質和環境因素共同決定：

影響因素 具體作用

粒子自身性質 1. 電荷量：電荷越多，電場力越大，遷移越快（如 DNA 帶負電，電荷量隨片段長度增加而增多）；

2. 分子大小：分子越小，介質阻力越小，遷移越快（如小分子蛋白質比大分子蛋白質遷移快）；

3. 分子形狀：球形分子比線性 / 不規則分子阻力小，遷移更快（如球狀蛋白＞纖維狀蛋白）。

外部環境因素 1. 電場強度：電壓越高，電場力越強，遷移越快（需平衡速度與分辨率，電壓過高易導致發熱）；

2. 緩沖液：提供穩定 pH（維持粒子帶電狀態）和離子強度（影響電場傳導與粒子穩定性）；

3. 支持介質：如凝膠、濾紙等，通過孔徑大小 “篩選” 不同分子（核心作用，如瓊脂糖凝膠的多孔結構）。

技術優勢與局限性

優勢：

分辨率高：可區分結構 / 性質極相似的物質（如不同亞型的蛋白質、僅差 1 個堿基的 DNA 片段）；

樣品用量少：僅需微克（μg）甚至納克（ng）級樣品；

操作靈活：可通過調整介質、緩沖液、電場參數適配不同樣品。

局限性：

部分技術（如 PAGE）操作較繁瑣，對實驗條件要求高（如凝膠制備需避免氣泡）；

變性電泳（如 SDS-PAGE）會破壞生物活性，無法用于活性物質純化；

大分子物質（如基因組 DNA）分離效率較低，需結合脈沖場凝膠電泳（PFGE）等特殊技術。

總之，電泳是現代實驗室 “分離分析” 的基石，其技術發展（如與質譜、色譜聯用）進一步拓展了在醫學、組學研究等領域的應用邊界。

磷化處理

目的：在工件表面形成一層均勻致密的磷酸鹽結晶膜（厚度 1-5μm），增強電泳涂層的附著力和耐腐蝕性。

工藝：浸入磷化液（常用鋅系、錳系），溫度 30-45℃，時間 5-10 分鐘（噴淋磷化效率更高）。

關鍵：磷化膜應呈灰色或淺灰色，結晶均勻，無露底、發花現象（通過檢測膜重：2-5g/m2）。

電泳涂裝階段（核心：電場作用下涂料沉積）

此階段通過電場力使帶電涂料顆粒定向遷移并沉積在工件表面，形成均勻的濕膜。

工件掛裝

操作：將烘干后的工件固定在專用掛具上，確保工件與掛具導電良好（掛具需定期清理表面涂層，避免絕緣）。

注意：工件間距需均勻（通常 5-10cm），避免相互遮擋影響電場分布。

電泳槽浸涂

核心：工件作為電極（陰極電泳中工件為陰極，陽極電泳中為陽極），與槽內對應電極板形成電場，涂料顆粒（陽離子或陰離子）向工件遷移并沉積。

關鍵參數：

電壓：陰極電泳 60-300V，陽極電泳 20-80V（復雜工件用低電壓、長時間，簡單工件用高電壓、短時間）；

溫度：槽液溫度 20-30℃（偏差需控制在 ±2℃，否則影響涂料穩定性）；

時間：1-5 分鐘（根據目標涂層厚度調整，干膜厚度通常 20-50μm）；

槽液參數：固體分 18%-22%、pH 值 6.0-7.5（陰極）、電導率 1000-2000μS/cm（需實時監測調整）。

超濾水洗

目的：回收工件表面未沉積的涂料（通過超濾膜過濾槽液得到 “超濾水”），減少浪費和廢水排放。

工藝：用超濾水噴淋或浸泡工件，時間 1-2 分鐘，回收的涂料可返回電泳槽循環使用。

純水洗（電泳后）

目的：清除殘留的超濾水和微量涂料，確保涂層表面潔凈，避免烘干后出現污漬。

工藝：去離子水沖洗，時間 1-2 分鐘，電導率＜10μS/cm。